Ukanda na Barabara: Ushirikiano, Maelewano na Ushindi kwa Ushindi
habari

habari

Matumizi ya protiniasesi ya kitendanishi cha uchunguzi wa ndani ya vitro K 39450-1-6 katika uchimbaji wa asidi ya kiini

Kuna mashujaa wengi wasioimbwa karibu nasi, ambao wanaonekana kuwa wa kawaida, lakini kwa kweli wanachangia mengi kimya kimya kwetu. Protini K ni "shujaa asiyeimbwa" katika tasnia ya uchunguzi wa molekuli, ingawa ikilinganishwa na "kubwa na yenye nguvu" katika tasnia, protini K ni ya chini sana hivi kwamba tumepuuza umuhimu wake kwa muda mrefu. Kwa kuzuka kwa janga jipya la taji, mahitaji ya protini K yameongezeka, na usambazaji ndani na nje ya nchi uko nyuma sana ya matumizi, na kila mtu ghafla aligundua kuwa protini K ni muhimu sana.

Matumizi ya protini K ni nini?
Protini K ni protiasi ya serine yenye shughuli ya kimeng'enya cha proteolisi na inaweza kudumisha shughuli katika mazingira mbalimbali (pH (4-12.5), bafa ya chumvi nyingi, halijoto ya juu ya 70°C, n.k.). Zaidi ya hayo, shughuli ya protiasi K haizuiliwi na SDS, urea, EDTA, guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, n.k., na kiasi fulani cha sabuni kinaweza pia kuongeza shughuli ya protiasi K. Katika matibabu (virusi na vijidudu), chakula (kulainisha nyama), ngozi (kulainisha nywele), kutengeneza divai (uboreshaji wa pombe), utayarishaji wa asidi ya amino (manyoya yaliyoharibika), uchimbaji wa asidi ya nucleiki, mseto wa ndani, n.k., protiasi K Kuna matumizi. Matumizi yanayotumika sana ni uchimbaji wa asidi ya nucleiki.
Protini K inaweza kufyonza protini za aina zote kwenye sampuli, ikiwa ni pamoja na histoni ambazo zimeunganishwa kwa ukali na asidi za nyuklia, ili asidi za nyuklia ziweze kutolewa kutoka kwenye sampuli na kutolewa kwenye dondoo, na kurahisisha hatua inayofuata ya uchimbaji na utakaso. Katika kugundua asidi ya nyuklia ya virusi, protini K ni mojawapo ya vipengele muhimu katika suluhisho la sampuli ya virusi. Protini K inaweza kupasuka na kuzima protini ya koti ya virusi, ambayo ni salama zaidi wakati wa hatua ya usafirishaji na ugunduzi; kwa kuongezea, protini K inaweza pia kuharibu RNase. Huzuia uharibifu wa RNA ya virusi na kuwezesha ugunduzi wa asidi ya nyuklia.

Umaarufu wa usiku mmoja wa protini K
Iwe katika uwanja wa utafiti wa kisayansi au katika uwanja wa IVD, uchimbaji wa asidi ya nukleiki ndio jaribio la msingi zaidi, kwa hivyo protini K imekuwa kuwepo muhimu sana kila wakati. Hata hivyo, hapo awali, protini K haikujulikana sana kuliko jukumu lake. Sehemu kubwa ya hii ni kwa sababu uhusiano wa usambazaji na mahitaji ya protini K ulikuwa thabiti sana. Watu wachache wangefikiri kwamba usambazaji wa protini K ungekuwa tatizo.
Kwa kuzuka kwa janga jipya la taji, mahitaji ya upimaji wa asidi ya nyuklia yameongezeka. Kufikia mwishoni mwa Juni 2020, Uchina imekamilisha karibu majaribio mapya milioni 90 ya taji, na idadi hii inatisha zaidi kwa kiwango cha kimataifa. Katika majaribio ya uchimbaji wa asidi ya nyuklia, mkusanyiko wa protini K unaofanya kazi ni takriban 50-200 μg/mL. Kwa ujumla, inachukua takriban 100 μg ya protini K kutoa sampuli ya asidi ya nyuklia. Katika matumizi halisi, ili kuongeza ufanisi wa uchimbaji wa asidi ya nyuklia, mara nyingi Protini K itatumika kwa kiwango kilichoongezeka. Kugundua asidi ya nyuklia ya virusi vipya vya korona kumeleta kiwango kikubwa cha mahitaji ya protini K. Usawa wa awali wa usambazaji na mahitaji ya protini K ulivunjwa haraka, na protini K ikawa nyenzo muhimu ya kuzuia janga usiku kucha.

Ugumu katika uzalishaji wa protini K
Ingawa kutokana na ukuaji wa janga hili, thamani muhimu ya protini K imethaminiwa na watu, ni jambo la aibu kwamba kutokana na kiwango kidogo cha protini K, makampuni machache ya ndani yamehusika katika uzalishaji wa protini K. Watu wanapotaka kuanzisha uzalishaji wa protini K Wakati wa mchakato wa uzalishaji, iligundulika kuwa protini K ni protini maalum sana. Ni changamoto kubwa kupanua uwezo wa uzalishaji wa protini K kwa muda mfupi.

Uzalishaji mkubwa wa protini K unakabiliwa na matatizo yafuatayo
1. Usemi wa chini
Protini K inaweza kuharibu protini nyingi bila kuathiri protini maalum na kusababisha sumu kali kwa seli mwenyeji wa usemi. Kwa hivyo, kiwango cha usemi cha protini K kwa ujumla ni cha chini sana. Uchunguzi wa mifumo ya usemi na aina zinazotoa protini K kwa kiasi kikubwa kwa ujumla unahitaji mzunguko mrefu zaidi.
2. Mabaki ya rangi na asidi za kiini
Uchachushaji mkubwa huanzisha kiasi kikubwa cha mabaki ya rangi na asidi ya kiini ya mwenyeji. Ni vigumu kuondoa uchafu huu kwa mchakato rahisi wa utakaso, na utakaso tata huongeza gharama na kupunguza kiwango cha urejeshaji.
3. Kutokuwa na utulivu
Protini K si imara vya kutosha, inaweza kujitengeneza yenyewe, na ni vigumu kuihifadhi kwa utulivu kwenye 37°C kwa muda mrefu bila dawa ya kinga.
4. Rahisi kuteleza
Wakati wa kuandaa unga uliokaushwa wa protini K uliogandishwa, ili kuhakikisha kwamba kiwango kigumu cha protini K katika unga uliokaushwa wa kugandishwa ni kikubwa, ni muhimu kuongeza kikali cha kinga kilichokaushwa kwa kugandishwa kwa kiwango cha juu, lakini wakati kiwango cha protini K kinafikia 20mg/mL na zaidi, ni rahisi. Mkusanyiko huunda mvuke, ambao huleta ugumu mkubwa kwa kukausha kwa protini K kwa kiwango kikubwa.
5. Uwekezaji mkubwa
Protini K ina shughuli kubwa ya protini na inaweza kuhaidreyiza protini zingine katika maabara. Kwa hivyo, protini K inahitaji maeneo maalum ya uzalishaji, vifaa, na wafanyakazi kwa ajili ya utafiti, maendeleo na uzalishaji.

Suluhisho la protini K la XD BIOCHEM
XD BIOCHEM ina mfumo wa usemi na utakaso wa protini uliokomaa, na ina uzoefu mkubwa katika usemi na utakaso wa protini zinazoungana tena na uboreshaji wa michakato ya uzalishaji. Kupitia uundaji wa haraka wa timu ya utafiti na maendeleo, mchakato mkubwa wa uzalishaji wa protini K umeshindwa. Pato la kila mwezi la unga uliokaushwa kwa kugandishwa ni zaidi ya kilo 30. Bidhaa hiyo ina utendaji thabiti, shughuli kubwa maalum ya kimeng'enya, na hakuna mabaki ya saitokromu mwenyeji na asidi ya kiini. Karibu uwasiliane na XD BIOCHEM Pata kifurushi cha majaribio (Barua pepe:sales@xdbiochem.comSimu: +86 513 81163739).
Suluhisho za kiufundi za XD BIOCHEM ni pamoja na
Kwa kutumia muunganiko wa plasmidi zenye nakala nyingi, aina za usemi wa juu zenye kiwango cha usemi cha 8g/L huchaguliwa, jambo ambalo hushinda tatizo la kiwango cha chini cha usemi wa protini K.
Kupitia uanzishwaji wa mchakato wa utakaso wa hatua nyingi, mabaki ya saitokromu mwenyeji na asidi ya kiini ya protini K yaliondolewa kwa ufanisi chini ya thamani ya kawaida.
Kupitia uchunguzi wa kiwango cha juu cha viambato vya kinga, kihifadhi ambacho kinaweza kuhifadhi protini K kwa uthabiti kwenye 37°C kilichaguliwa.
Vizuizi vya uchunguzi hushinda tatizo kwamba protini K ni rahisi kukusanya na kuharakisha kwa viwango vya juu, na huweka msingi wa kukausha kwa kugandisha kwa kiwango kikubwa cha protini K.

Protini ya kitendanishi cha uchunguzi K1
Protiniasi ya kitendanishi cha uchunguzi K2

Sampuli ya protini ya XD BIOCHEM K

Protiniasi ya kitendanishi cha uchunguzi K3

Kipimo cha uthabiti wa protini ya K ya XD BIOCHEM: hakutakuwa na mabadiliko makubwa katika shughuli baada ya siku 80 kwenye joto la kawaida

Protiniasi ya kitendanishi cha uchunguzi K4

Kipimo cha uthabiti wa protini ya K ya XD BIOCHEM: hakutakuwa na mabadiliko makubwa katika shughuli baada ya siku 80 kwenye joto la kawaida.

Ulinganisho wa athari ya uchimbaji wa asidi ya kiini ya protini ya XD BIOCHEM K na bidhaa zinazoshindana. Katika mchakato wa uchimbaji wa asidi ya kiini, XD BIOCHEM na protini ya ushindani K hutumiwa mtawalia. Ufanisi wa uchimbaji wa protini ya XD BIOCHEM K ni wa juu zaidi na thamani ya Ct ya jeni lengwa ni ya chini.


Muda wa chapisho: Desemba-31-2021