Kuna mashujaa wengi ambao hawajaimbwa karibu nasi, ambao wanaonekana kuwa wa kawaida, lakini kwa kweli wanatuchangia sana kimya kimya.Proteinase K ni "shujaa asiyejulikana" katika tasnia ya uchunguzi wa molekuli, ingawa ikilinganishwa na "kubwa na yenye nguvu" katika tasnia, proteinase K ni ya chini sana hivi kwamba kwa muda mrefu tumepuuza umuhimu wake.Pamoja na kuzuka kwa janga jipya la taji, mahitaji ya protiniase K yameongezeka, na usambazaji wa nyumbani na nje ya nchi uko nyuma sana kwa matumizi, na kila mtu ghafla aligundua kuwa proteinase K ni muhimu sana.
Matumizi ya proteinase K ni nini?
Proteinase K ni serine protease yenye shughuli ya kimeng'enya cha proteolytic na inaweza kudumisha shughuli katika mazingira mbalimbali (pH (4-12.5), bafa ya chumvi nyingi, joto la juu la 70°C, n.k.).Kwa kuongezea, shughuli za proteinase K hazizuiliwi na SDS, urea, EDTA, guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, nk, na kiasi fulani cha sabuni pia inaweza kuongeza shughuli za proteinase K. Katika matibabu ya matibabu (virusi na disinfection ya vijidudu). ), chakula (kulainisha nyama), ngozi (kulainisha nywele), kutengeneza mvinyo (ufafanuzi wa pombe), utayarishaji wa asidi ya amino (manyoya yaliyoharibika), uchimbaji wa asidi ya nucleic, mseto wa situ, nk, proteinase K Kuna maombi.Utumizi unaotumiwa zaidi ni uchimbaji wa asidi ya nucleic.
Proteinase K inaweza enzymolyze kila aina ya protini katika sampuli, ikiwa ni pamoja na histones ambayo ni tightly amefungwa kwa asidi nucleic, ili asidi nucleic inaweza kutolewa kutoka sampuli na kutolewa katika dondoo, kuwezesha hatua inayofuata ya uchimbaji na utakaso.Katika ugunduzi wa asidi ya nucleic ya virusi, proteinase K ni mojawapo ya vipengele muhimu katika ufumbuzi wa sampuli za virusi.Proteinase K inaweza kupasuka na kuzima protini ya koti ya virusi, ambayo ni salama zaidi wakati wa usafiri na hatua ya kugundua;kwa kuongeza, protiniase K pia inaweza kuharibu RNase huzuia uharibifu wa RNA ya virusi na kuwezesha ugunduzi wa asidi ya nucleic.
Umaarufu wa usiku wa proteinase K
Iwe katika nyanja ya utafiti wa kisayansi au katika uwanja wa IVD, uchimbaji wa asidi ya nukleiki ndilo jaribio la msingi zaidi, kwa hivyo protiniase K daima imekuwa jambo muhimu sana.Walakini, hapo awali, proteinase K haikujulikana sana kuliko jukumu lake.Sehemu kubwa ya hii ilikuwa kwa sababu uhusiano wa usambazaji na mahitaji ya proteinase K ulikuwa thabiti sana.Watu wachache wangefikiri kwamba ugavi wa proteinase K ungekuwa tatizo.
Pamoja na kuzuka kwa janga jipya la taji, mahitaji ya upimaji wa asidi ya nucleic yameongezeka.Kufikia mwishoni mwa Juni 2020, Uchina imekamilisha majaribio mapya ya taji karibu milioni 90, na idadi hii inatisha zaidi ulimwenguni.Katika majaribio ya uchimbaji wa asidi ya nucleic, mkusanyiko wa kazi wa proteinase K ni karibu 50-200 μg/mL.Kwa ujumla, inachukua takriban 100 μg ya proteinase K ili kutoa sampuli ya asidi nucleic.Katika matumizi halisi, ili kuongeza ufanisi wa uchimbaji wa asidi ya nucleic, mara nyingi Proteinase K itatumika kwa kiasi kilichoongezeka.Ugunduzi wa asidi ya nyuklia ya coronavirus mpya umeleta idadi kubwa ya mahitaji ya proteinase K.Usawa asili wa usambazaji na mahitaji ya proteinase K ulivunjwa haraka, na proteinase K ikawa nyenzo muhimu ya kuzuia janga mara moja.
Ugumu katika utengenezaji wa proteinase K
Ingawa kutokana na maendeleo ya janga hili, thamani muhimu ya protiniase K imethaminiwa na watu, inatia aibu kwamba kutokana na ufunguo mdogo wa proteinase K, makampuni machache ya ndani yamehusika katika uzalishaji wa protiniase K. Wakati watu wanataka kuanzisha uzalishaji wa proteinase K Wakati wa mchakato wa uzalishaji, iligunduliwa kuwa proteinase K ni protini maalum sana.Ni changamoto sana kupanua uwezo wa uzalishaji wa proteinase K katika muda mfupi.
Uzalishaji mkubwa wa proteinase K unakabiliwa na matatizo yafuatayo
1. Usemi wa chini
Proteinase K inaweza kuharibu protini nyingi bila mahususi na kusababisha sumu kali kwa seli ya kujieleza.Kwa hivyo, kiwango cha kujieleza cha proteinase K kwa ujumla ni cha chini sana.Uchunguzi wa mifumo ya kujieleza na aina zinazoonyesha protiniase K kwa ujumla huhitaji mzunguko mrefu zaidi.
2. Mabaki ya rangi na asidi ya nucleic
Uchachushaji wa kiasi kikubwa huleta kiasi kikubwa cha rangi na mabaki ya asidi ya nucleic.Ni vigumu kuondoa uchafu huu kwa mchakato rahisi wa utakaso, na utakaso tata huongeza gharama na hupunguza kiwango cha kurejesha.
3. Kutokuwa na utulivu
Proteinase K haina utulivu wa kutosha, inaweza enzymolyze yenyewe, na ni vigumu kuihifadhi kwa utulivu saa 37 ° C kwa muda mrefu bila wakala wa kinga.
4. Rahisi kunyesha
Wakati wa kuandaa poda iliyokaushwa ya protiniase K, ili kuhakikisha kuwa yaliyomo kigumu ya proteinase K kwenye poda iliyokaushwa ni kubwa, ni muhimu kuongeza wakala wa kinga iliyokaushwa kwa mkusanyiko wa juu, lakini wakati ukolezi wa proteinase K hufikia 20mg/mL na zaidi, ni rahisi Mkusanyiko huunda mvua, ambayo huleta matatizo makubwa katika kuganda kwa proteinase K yenye maudhui ya juu ya kigumu.
5. Uwekezaji mkubwa
Proteinase K ina shughuli kali ya protease na inaweza kuhairisha protini nyingine kwenye maabara.Kwa hivyo, proteinase K inahitaji maeneo maalum ya uzalishaji, vifaa, na wafanyikazi kwa utafiti na ukuzaji na uzalishaji.
Suluhisho la XD BIOCHEM la proteinase K
XD BIOCHEM ina udhihirisho wa protini uliokomaa na jukwaa la utakaso, na ina tajriba tele katika usemi na utakaso wa protini recombinant na uboreshaji wa michakato ya uzalishaji.Kupitia uundaji wa haraka wa timu ya utafiti na maendeleo, mchakato mkubwa wa uzalishaji wa proteinase K umeshindwa.Pato la kila mwezi la poda iliyokaushwa kwa kufungia ni zaidi ya KG 30.Bidhaa hii ina utendakazi thabiti, shughuli maalum ya kimeng'enya cha juu, na haina saitokromu na mabaki ya asidi ya nukleiki.Karibu uwasiliane na XD BIOCHEM Pata kifurushi cha majaribio (Barua pepe:sales@xdbiochem.comSimu: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM ya ufumbuzi wa kiufundi ni pamoja na
Kwa kutumia muunganisho wa plasmid wa nakala nyingi, aina za usemi wa juu na kiwango cha kujieleza cha 8g/L huchaguliwa, ambayo hushinda tatizo la kiwango cha chini cha kujieleza cha proteinase K.
Kupitia kuanzishwa kwa mchakato wa utakaso wa hatua nyingi, mabaki ya saitokromu na asidi ya nukleiki ya proteinase K yaliondolewa kwa ufanisi chini ya thamani ya kawaida.
Kupitia uchunguzi wa juu wa uundaji wa bafa za kinga, bafa inayoweza kuhifadhi protiniase K katika 37°C ilichaguliwa.
Viakio vya uchunguzi husuluhisha tatizo la kwamba proteinase K ni rahisi kujumlisha na kunyesha katika viwango vya juu, na huweka msingi wa kukausha kwa kiwango cha juu cha proteinase K.
Sampuli ya XD BIOCHEM proteinase K
Mtihani wa uthabiti wa XD BIOCHEM proteinase K: hakutakuwa na mabadiliko makubwa katika shughuli baada ya 80 d kwenye joto la kawaida.
Jaribio la uthabiti la XD BIOCHEM proteinase K: hakutakuwa na mabadiliko makubwa katika shughuli baada ya 80 d kwenye joto la kawaida.
Ulinganisho wa athari ya uchimbaji wa asidi ya nucleic ya XD BIOCHEM proteinase K na bidhaa zinazoshindana.Katika mchakato wa uchimbaji wa asidi ya nucleic, XD BIOCHEM na protiniase K ya ushindani hutumiwa kwa mtiririko huo.Ufanisi wa uchimbaji wa XD BIOCHEM proteinase K ni wa juu na thamani ya Ct ya jeni inayolengwa ni ya chini.
Muda wa kutuma: Dec-31-2021