4-Nitrofenili beta-D-galaktopiranoside CAS:200422-18-0

Athari: ONPG ni substrate inayotumika mahsusi kugundua uwepo na shughuli ya kimeng'enya cha β-galactosidase. Wakati kimeng'enya cha β-galactosidase kipo na kinafanya kazi, hugawanya ONPG katika bidhaa mbili: o-nitrofenoli na derivative ya galactose. Ukombozi wa o-nitrofenoli husababisha mabadiliko ya rangi ya njano, ambayo yanaweza kupimwa kwa kutumia spectrophotometer.

Matumizi: ONPG ina matumizi kadhaa katika utafiti wa biolojia ya molekuli na biokemia:

Uamuzi wa shughuli ya β-galactosidase: ONPG hutumika sana kupima na kupima shughuli ya kimeng'enya cha β-galactosidase. Kiwango cha uundaji wa o-nitrofenoli, ambacho ni sawa moja kwa moja na shughuli ya kimeng'enya, kinaweza kupimwa kwa kutumia spectrophotometric.

Usemi na udhibiti wa jeni: ONPG mara nyingi hutumika katika majaribio yanayohusiana na usemi na tafiti za udhibiti wa jeni. Mara nyingi hutumika katika majaribio ya protini ya muunganiko, kama vile mfumo wa muunganiko wa lacZ unaotumika sana, ili kusoma usemi wa jeni chini ya udhibiti wa vichocheo maalum. Shughuli ya beta-galactosidase inayopimwa kwa kutumia ONPG hutoa ufahamu kuhusu kiwango cha usemi wa jeni.

Uchunguzi wa shughuli ya β-galactosidase: ONPG inaweza kutumika kama mbinu ya uchunguzi wa rangi katika teknolojia ya DNA iliyounganishwa ili kutambua uwepo na utendaji kazi wa jeni la LacZ, ambalo husimba β-galactosidase. Njia hii ya uchunguzi husaidia katika kutambua kloni zilizo na jeni linalovutia.

Uchunguzi wa kinetiki wa kimeng'enya: ONPG pia ni muhimu katika kusoma kinetiki ya kimeng'enya cha β-galactosidase. Kwa kupima kiwango cha mmenyuko wa kimeng'enya-substrate katika viwango tofauti vya substrate, inawezekana kubaini vigezo vya kinetiki kama vile vigeu vya Michaelis-Menten (Km) na viwango vya juu vya mmenyuko (Vmax).