4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS:200422-18-0

Athari: ONPG ni sehemu ndogo inayotumiwa hasa kutambua uwepo na shughuli ya kimeng'enya cha β-galactosidase.Wakati kimeng'enya cha β-galactosidase kipo na amilifu, hupasua ONPG katika bidhaa mbili: o-nitrophenol na derivative ya galactose.Ukombozi wa o-nitrophenol husababisha mabadiliko ya rangi ya njano, ambayo inaweza kupimwa kwa kutumia spectrophotometer.

Maombi: ONPG ina matumizi kadhaa katika biolojia ya molekuli na utafiti wa biokemia:

Uamuzi wa shughuli ya β-galactosidase: ONPG hutumiwa kwa kawaida kupima na kukadiria shughuli ya kimeng'enya cha β-galactosidase.Kiwango cha uundaji wa o-nitrophenoli, ambayo ni sawia moja kwa moja na shughuli ya kimeng'enya, inaweza kupimwa spectrophotometrically.

Usemi na udhibiti wa jeni: ONPG mara nyingi hutumika katika majaribio yanayohusiana na usemi wa jeni na masomo ya udhibiti.Hutumika mara kwa mara katika majaribio ya protini ya muunganisho, kama vile mfumo wa muunganisho wa lacZ unaotumika sana, kusoma usemi wa jeni chini ya udhibiti wa wakuzaji mahususi.Shughuli ya beta-galactosidase inayopimwa kwa kutumia ONPG hutoa maarifa katika kiwango cha usemi wa jeni.

Uchunguzi wa shughuli ya β-galactosidase: ONPG inaweza kutumika kama njia ya uchunguzi wa rangi katika teknolojia ya DNA inayojumuisha ili kutambua uwepo na utendaji wa jeni la LacZ, ambalo husimba β-galactosidase.Njia hii ya uchunguzi husaidia katika kutambua clones ambazo zina jeni la maslahi.

Masomo ya kinetics ya enzyme: ONPG pia ni muhimu katika kusoma kinetiki ya enzyme ya β-galactosidase.Kwa kupima kiwango cha mmenyuko wa enzyme-substrate katika viwango tofauti vya substrate, inawezekana kuamua vigezo vya kinetic kama vile Michaelis-Menten constants (Km) na viwango vya juu vya athari (Vmax).