IPTG CAS:367-93-1 Bei ya Mtengenezaji
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) ni analogi ya sintetiki ya laktosi ambayo hutumiwa kwa kawaida katika utafiti wa baiolojia ya molekuli na matumizi ya teknolojia ya kibayoteknolojia.IPTG hutumika kimsingi kushawishi usemi wa jeni katika mifumo ya bakteria, ambapo hutumika kama kichochezi cha molekuli kuanzisha unukuzi wa jeni lengwa.
Inapoongezwa kwenye kati ya ukuaji, IPTG inachukuliwa na bakteria na inaweza kumfunga kwa protini ya lac repressor, kuizuia kuzuia shughuli za lac operon.Operon ya lac ni kundi la jeni linalohusika na kimetaboliki ya lactose, na wakati protini ya kukandamiza inapoondolewa, jeni huonyeshwa.
IPTG mara nyingi hutumiwa pamoja na kikuza mutant lacUV5, ambalo ni toleo linalotumika la kikuza lac.Kwa kuchanganya utangulizi wa IPTG na mkuzaji huyu anayebadilika, watafiti wanaweza kufikia viwango vya juu vya usemi wa jeni.Hii inaruhusu uzalishaji wa kiasi kikubwa cha protini kwa ajili ya utakaso au matumizi mengine ya chini ya mkondo.
Mbali na usemi wa jeni, IPTG pia hutumiwa mara kwa mara katika majaribio ya uchunguzi wa bluu/nyeupe.Katika mbinu hii, jeni la lacZ kwa kawaida huunganishwa kwa jeni la kuvutia, na bakteria wanaofaulu kueleza jeni hii ya muunganisho watazalisha kimeng'enya amilifu cha β-galactosidase.IPTG inapoongezwa pamoja na substrate ya chromojeni kama vile X-gal, bakteria zinazoonyesha jeni la muunganisho hubadilika kuwa samawati kutokana na shughuli ya β-galactosidase.Hii inaruhusu utambuzi na uteuzi wa aina recombinant ambayo imefanikiwa kuunganisha jeni la maslahi.
Uingizaji wa usemi wa jeni: IPTG hutumiwa kwa kawaida kushawishi usemi wa jeni lengwa katika mifumo ya bakteria.Inaiga lactose ya asili ya inducer na kumfunga kwa protini ya lac repressor, kuizuia kuzuia lac operon.Hii inaruhusu unukuzi na usemi wa jeni zinazohitajika.
Kujieleza na utakaso wa protini: Uingizaji wa IPTG mara nyingi hutumiwa kuzalisha kiasi kikubwa cha protini recombinant kwa madhumuni mbalimbali, kama vile masomo ya biokemikali, uzalishaji wa matibabu, au uchambuzi wa muundo.Kwa kutumia vekta za kujieleza zinazofaa na uanzishaji wa IPTG, watafiti wanaweza kufikia viwango vya juu vya uzalishaji wa protini lengwa katika mwenyeji wa bakteria.
Uchunguzi wa bluu/nyeupe: IPTG hutumiwa mara kwa mara pamoja na jeni lacZ na substrate ya kromogenic, kama vile X-gal, kwa majaribio ya uchunguzi wa samawati/nyeupe.Jeni ya lacZ kwa kawaida huunganishwa kwenye jeni inayokuvutia, na bakteria wanaoeleza kwa mafanikio jeni hii ya muunganisho watazalisha kimeng'enya amilifu cha β-galactosidase.IPTG na substrate ya chromojeniki zinapoongezwa, aina recombinant inayoonyesha jeni la muunganisho hubadilika kuwa samawati, hivyo kuruhusu utambulisho na uteuzi kwa urahisi.
Utafiti wa udhibiti wa jeni: Uanzishaji wa IPTG hutumiwa kwa kawaida katika utafiti kusoma udhibiti wa jeni na opereni, haswa opereni ya lac.Kwa kudhibiti viwango vya IPTG na kufuatilia usemi wa vijenzi lac operon, watafiti wanaweza kuchunguza taratibu za udhibiti wa jeni na jukumu la vipengele au mabadiliko mbalimbali.
Mifumo ya usemi wa jeni: IPTG ni sehemu muhimu katika mifumo kadhaa ya usemi wa jeni, kama vile mifumo inayotegemea promota wa T7.Katika mifumo hii, kikuza lac mara nyingi hutumiwa kuendesha usemi wa T7 RNA polymerase, ambayo, kwa upande wake, huandika jeni lengwa chini ya udhibiti wa mfuatano wa wakuzaji wa T7.IPTG inatumika kushawishi usemi wa T7 RNA polimasi, na kusababisha kuwezesha usemi wa jeni lengwa.
| Muundo | C9H18O5S |
| Uchunguzi | 99% |
| Mwonekano | Poda nyeupe |
| Nambari ya CAS. | 367-93-1 |
| Ufungashaji | Ndogo na wingi |
| Maisha ya Rafu | miaka 2 |
| Hifadhi | Hifadhi mahali pa baridi na kavu |
| Uthibitisho | ISO. |
